中药配方颗粒与传统复方汤剂比较研究

  2017-09-27  国医在线  阅读   

冯莉萍 刘佳 汤泮泮 崔涛 王京昆 杨增明

(云南省药物研究所 云南白药集团创新研发中心 云南省中医药学会中药(民族药)专业委员会)

(本论文荣获“第四届兰茂论坛”优秀论文二等奖)

  摘要:目的对中药饮片与其不同厂家配方颗粒、多种传统复方汤剂间指标成分的差异进行比较研究。方法选择3种中药饮片、2个厂家相应的配方颗粒及自制配方颗粒、4首相应的传统复方汤剂,研究建立各饮片主要指标成分的HPLC特征图谱及含量测定方法。结果同一种饮片的主要指标成分,在不同厂家配方颗粒中的含量差异在1.3 ~ 6.5倍,多在2 ~ 3倍之间,多数RSD在40%左右;在不同传统汤剂中的转移率差异在1.1 ~ 3.5倍之间,多在1.0 ~ 1.5倍之间,一半的RSD小于10%;配方颗粒中与传统汤剂比较,非生物碱成分的转移率基本一致,而生物碱成分则存在较大差异。结论饮片主要指标成分在不同传统汤剂中的差异普遍小于在不同厂家配方颗粒中的差异,也小于不同产地饮片间的差异;配方颗粒与传统汤剂中多数主要指标成分的转移率基本一致。

  关键词:中药;配方颗粒;汤剂;比较研究

  中药配方颗粒是由单味中药饮片经水提、浓缩、干燥、制粒而成,在中医临床配方后,供患者冲服使用[1]。中药配方颗粒保留了原饮片的药性、药效,具有易于调剂,携带、运输、储存、服用方便等优点[2],同时还具有剂量准确、卫生[3],以及生产规范、质量稳定、易于监管等优点。但是,传统复方汤剂在煎煮过程中,各饮片不同成分间的助溶和增溶作用,以及酸碱中和、水解、聚合、重排等化学反应可能普遍存在[4]。因此,与传统复方汤剂在有效性、安全性方面是否一致,与传统饮片的剂量关系如何等等,一直是中药配方颗粒争论、研究的核心问题,也是影响、制约配方颗粒应用、发展的主要障碍。

  配方颗粒与对应的某一传统汤剂间有效成分差异的对比研究已有文献报道[5-7],本研究就同一饮片在不同汤剂中,以及同一汤剂中不同饮片有效成分的含量及转移率进行研究,并与相应饮片配方颗粒进行比较,为中药配方颗粒研究与评价提供参考。

  1、仪器与材料

  DIONEX Ultimate 3000高效液相色谱仪(赛默飞世尔科技)。EYELA N-1000旋转蒸发仪,上海爱郎仪器有限公司。Mettler Toledo AG--285分析天平。ZPG-5离心喷雾干燥机(江苏宇通干燥工程有限公司)。HPLC用甲醇、乙腈均为色谱纯(德国Merck KGaA Group),其他试剂为分析纯。对照品黄芩苷(1)(批号110715-201318)、甘草苷(2)(批号111610-201106)、甘草酸铵(3)(批号110731-201418)、盐酸小檗碱(4)(批号110713-200911)以及对照药材黄芩(批号120955-201309)、甘草(批号120904-200512)均购自中国食品药品检定研究院。

  所有中药饮片均购自云南白药集团中药资源有限公司,均依据文献[8]鉴定并检验合格,其中,饮片甘草来源为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.,黄连来源为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.(习称“味连”)。2个厂家的市售中药配方颗粒经医师处方购自云南省中医医院,均为国家批准的科研试点企业产品。

  2、方法与结果

  2.1 供试品的制备

  2.1.1 配方颗粒的制备[9-10]分别称取中药饮片黄芩片、甘草、黄连片各10 ~ 15 kg,分别加水适量,微沸煎煮提取二次,煎液滤过,滤液浓缩成清膏,喷雾干燥,加辅料适量,混匀,制成颗粒,分装,即得三种自制配方颗粒。

  2.1.2 复方汤剂的选择与制备选择以下4种传统复方汤剂作为对比研究载体。

  ⑴泻心汤:大黄10g,黄连5g,黄芩5g。

  ⑵黄连汤:黄连9g,甘草9g(炙),干姜9g,桂枝9g(去皮),人参6g,半夏6g(洗),大枣12枚(擘)。

  ⑶黄芩汤:黄芩10 g、芍药10 g、甘草10 g、大枣70 g。

  ⑷甘草黄芩汤:甘草2钱,黄芩2钱,茯苓3钱,半夏3钱,石膏3钱。

  制备方法:照处方,按总饮片约100 g计算投料,取各饮片,加水煎煮二次,第一次加水约7倍量,浸泡30min,微沸煎煮30分钟,第二次加水约6倍量,微沸煎煮20分钟,100目滤布滤过,滤液60℃减压浓缩至每1ml含0.2g总饮片,即得。

  2.1.3 复方汤剂阴性的制备照上述复方汤剂的制备方法,不加相应饮片,同法制备,即得。

  2.2 色谱条件[8]

  以Waters Sunfire C18(4.6×150 mm,5 μm)或Ecosil 120-5-C18 EPS(4.6×250 mm,5 μm)为色谱柱,进样量10 μl,体积流量1 ml/min,柱温30℃。

  ⑴黄芩:以甲醇-0.3%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱(0 → 60分钟,甲醇15% → 85%)。检测波长280 nm。

  ⑵甘草:以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱(0 → 8分钟,乙腈19%;8 → 35分钟,乙腈19%→ 50%)。检测波长223 nm。

  ⑶黄连:以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(50︰50)(每100 ml中加十二烷基硫酸钠0.4 g,再以磷酸调节pH值为4.0)为流动相,检测波长345 nm。

  2.3 对照品溶液的制备

  分别取黄芩苷对照品、甘草苷对照品和甘草酸铵对照品、盐酸小檗碱对照品各适量,照文献[8]相应品种【含量测定】项下的方法,依法制成对照品溶液,即得。

  2.4供试品溶液的制备

  2.4.1 饮片供试品溶液的制备分别取中药饮片黄芩片、甘草、黄连片,照文献[8]相应品种【含量测定】项下的方法,依法制成适宜浓度的供试品溶液,即得。

  2.4.2 配方颗粒供试品溶液的制备取配方颗粒,研匀,精密称取适量,加水溶解并稀释制成适宜浓度的溶液,滤过,取续滤液,即得。

  2.4.3 复方汤剂及复方汤剂阴性供试品溶液的制备取复方汤剂及阴性供试品,分别混匀,精密量取适量,分别加水稀释制成适宜浓度的溶液,滤过,取续滤液,即得。

  2.5测定法

  分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,测定,计算,即得。

  2.6 测定结果

  结果见下表1、表2和图1、图2、图3。

  表1 不同厂家配方颗粒指标性成分HPLC含量测定结果表

  表2传统复方汤剂和配方颗粒指标性成分转移率比较

  从图1、图2、图3可以看出,除甘草中的甘草苷以外,各阴性样品对传统汤剂中相关饮片主要指标成分含量测定没有干扰,方法的专属性良好。

  从表1结果可以看出,不同厂家的同一配方颗粒,除甘草酸基本一致以外,主要指标成分含量普遍差异相当大,达1.3 ~ 6.5倍,多在2 ~ 3倍之间,多数RSD在40%左右。

  表2结果表明,同一饮片,在不同的传统复方汤剂中,其主要指标成分的转移率差异相对较小,在1.1 ~ 3.5倍之间,多在1.0 ~ 2.5倍之间,一半的RSD小于10%。表2的结果还表明,饮片主要指标成分在配方颗粒中的转移率,与传统汤剂比较,非生物碱成分基本一致,而生物碱成分则存在较大差异。

  图1、图2、图3结果还表明,HPLC色谱图中各主要色谱峰在不同样品中的差异与含量测定用指标成分(峰S)差异基本一致。

  3、讨论

  保持配方颗粒与传统汤剂在有效性、安全性上的一致性,是配方颗粒研究的核心任务和目标。临床实践中,同一饮片对应着众多组方不同的汤剂,这就给配方颗粒的研究与评价带来巨大的挑战。本研究的结果表明,传统汤剂间比较,多数成分的转移率基本一致,如黄芩苷、甘草酸、巴马汀和表小檗碱,有些成分却存在2 ~ 3倍得差异,如小檗碱和黄连碱;配方颗粒与传统汤剂间比较,有些成分的转移率基本一致,如黄芩苷、甘草酸,甘草苷的转移率也仅有约1倍的差异,另一些成分的转移率差异最高却达到了12.5倍,与文献[5, 11]报道基本一致。但是,配方颗粒与传统汤剂间转移率的差异,总体上小于不同产地药材间的差异[12-14],小于不同厂家间的差异[15-16]。

  一般而言,强生物碱类成分、挥发性成分(如丹皮酚、白术内酯Ⅲ)在配方颗粒与传统汤剂中的差异较大[6-7, 11],如果不进行有意识的调控的话,前者在配方颗粒中转移率较高,后者则在汤剂中的转移率较高,挥发性成分在配方颗粒的浓缩、干燥过程中损失较大。

  与单味制剂和成方制剂的工艺研究不同,配方颗粒生产工艺研究不能追求以指标成分(有效成分)最大溶出为核心的通常意义下的“最佳工艺”[17],更重要的应是追求配方颗粒与传统汤剂的质量一致性。依据饮片在传统汤剂中的溶出特征,针对性的调整配方颗粒的工艺参数,尽量做到二者的等量、等效,同时,尽快制定并出台统一的配方颗粒国家标准,是配方颗粒研究开发、行业发展和监督管理的关键之一。

  参考文献

  [1] 国家食品药品监督管理总局。《中药配方颗粒管理办法(征求意见稿)》。2015年。

  [2] 陈培胜,朱月信。中药配方颗粒行业标准研究思路[J]。中医杂志,2012,53(6):469-472

  [3] 李松林,宋景政,徐宏喜。中药配方颗粒研究浅析[J]。中草药,2009,40(增刊):1-7

  [4] 王智民,叶祖光,肖诗鹰,等。对中药配方颗粒发展的几点建议和应用前景分析[J]。中国中药杂志,2004,29(1):1-3

  [5] 冯靖,张应蓉,靳凤云,等。四逆散传统汤剂复方颗粒剂配方颗粒剂中甘草苷甘草酸的含量比较[J]。微量元素与健康研究,2017,34(1):35-37

  [6] 王杰,刘冰,周军,等。六味地黄配方颗粒与传统汤剂中6种有效成分的比较研究[J]。中草药,2015,46(19):2887-2891

  [7] 林伟雄,乐智勇,车海燕,等。吴茱萸汤颗粒剂、配方颗粒剂及传统汤剂中指标成分的含量比较[J]。中国实验方剂学杂志,2017,23(13):30-34

  [8] 国家药典委员会. 《中华人民共和国药典》2015年版一部[M]. 北京: 中国医药科技出版社,2015: 80-81, 301-302, 303-305.

  [9] 国家药典委员会。《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求(征求意见稿)》。2016年。

  [10] 广东省食药监局。广东省中药配方颗粒标准(第二册)。北京: 中国医药科技出版社。

  [11] 马跃平,刘晓秋,陈发奎. 泻心汤配方颗粒与标准汤剂的HPLC指纹图谱对照研究[J]. 中成药,2006,(03):317-321.

  [12] 薛黎明,秦雪梅,张丽增. 不同产地黄芩药材的黄芩苷含量测定及指纹图谱研究[J]. 中成药,2008,(01):10-13.

  [13] 尚晓娜,宋平顺,杨锡,等. HPLC梯度波长法同时测定甘肃省不同产地甘草中6种成分含量及主成分分析研究[J]. 中国现代中药,2012,(09):27-31.

  [14] 耿志鹏,郑海杰,张艺,等. RP-HPLC测定不同产地黄连中6种生物碱的含量[J]. 中国中药杂志,2010,(19):2576-2580.

  [15]郝云芳,倪艳,程玉钏,等. 茯苓、桂枝、白术和甘草配方颗粒质量比较[J]. 中国医药工业杂志,2015,(03):282-287.

  [16]雷鹏,刘韶,李新中,等. 不同厂家黄连配方颗粒中盐酸小檗碱、盐酸巴马亭和盐酸药根碱含量比较[J]. 中南药学,2005,(02):90-92.

  [17] 陈士林,刘安,李琦,等。中药饮片标准汤剂研究策略[J]。中国中药杂志,2016,41(8):1367-1375

责任编辑:高燕仙
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