大麻药的化学成分研究

  2017-09-27  国医在线  阅读   

李艳红 逯娅 罗鸣 田凯 李育晓 黄相中

(云南民族大学 民族药资源化学国家民族事务委员会—教育部重点实验室)

(本论文荣获“第四届兰茂论坛”优秀论文二等奖)

  摘要: 研究了豆科扁豆属植物大麻药(Dolichos falcata Klein)的化学成分,利用色谱法从其根的乙醇提取物中分离得到11个化合物,经波谱数据分析鉴定为4-氧-3,24-双降-2,4-裂环-12-烯-2,28-齐墩果烷酸(1)、2-羟基-3-氧-11α,12α-环氧-24-降型-1,4-二烯-28,13β-齐墩果烷内酯(2)、2-羟基-3-氧-24-降型-1,4,12-三烯-28-齐墩果烷酸(3)、齐墩果酸(4)、异常春藤皂甙元(5)、2α,3β,24-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸(6)、2α,3β-二羟基-12-烯-24,28齐墩果烷酸(7)、槐二醇(8)、大豆皂醇B(9)、大麻药甙A(10)、豆甾醇(11),其中化合物1和2是新的齐墩果烷型降三萜化合物。此外,本实验还对所分离得到的化合物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定,从中发现化合物1、3和4具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

  关键词: 大麻药;降三萜;α-葡萄糖苷酶抑制活性。

  Oleanane-type nortriterpenoids from Dolichos falcata

  Yanhong Li, Ya Lu, Ming Luo, Kai Tian, Yuxiao Li, Xiangzhong Huang

  (Key Laboratory of chemistry in Ethnic Medicinal Resouces, State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education, Yunnan Minzu University, Kunming 650504, Yunnan)

  Abstract: Phytochemical investigation on the chemical constituents from ethanol extracts of the roots of Dolichos falcata Klein led to the isolation of eleven compounds using various chromatography and characterized as 4-oxo-3,24-dinor-2,4-secoolean-12-ene-2,28-dioic acid (1), 2-hydroxy-3-oxo-11α,12α-epoxy-24-noroleana-1,4-dien-28,13β-olide (2), 2-hydroxy-3-oxo-24-noroleana-1,4,12-trien-28-oic acid (3), and four penylpropanoids oleanolic acid (4), 4-epihederagenin (5), hyptatic acid A (6), 2α,3β-dihyroxyolean-12-ene-24,28-didic acid (7), sophoradiol (8), soyasapogenol B (9), doliroside A (10), and stigmasterol (11), based on the detailed spectral analysis. All isolates were evaluated for their α-glucosidase inhibitory activities, 1, 3 and 4 of which displayed moderate α-glucosidase inhibitory activities.

  Key words:Dolichos falcata; nortriterpenoids; α-glucosidase inhibitory.

  大麻药为豆科(Leguminosae)扁豆属植物镰果扁豆(Dolichos falcata Klein)的根,为彝族和傣族应用最广泛的民间草药之一[1]。具有祛风湿、镇痛止血等功效,主要用于治疗风湿性关节疼痛、骨折、跌打损伤等,已被应用作为药物“云南红药胶囊”和“大麻药散”的主要成分之一[2,3]。现代研究表明,大麻药具有降血糖、抗炎、抑菌等活性[4-8]。为了系统了解大麻药的活性成分,为其深入开发应用提供数据支持,本研究对大麻药进行了化学成分研究,从中分离得到 11个化合物,分别鉴定为4-氧-3,24-双降-2,4-裂环-12-烯-2,28-齐墩果烷酸(1)、2-羟基-3-氧-11α,12α-环氧-24-降型-1,4-二烯-28,13β-齐墩果烷内酯(2)、2-羟基-3-氧-24-降型-1,4,12-三烯-28-齐墩果烷酸(3)、齐墩果酸(4)、异常春藤皂甙元(5)、2α,3β,24-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸(6)、2α,3β-二羟基-12-烯-24,28齐墩果烷酸(7)、槐二醇(8)、大豆皂醇B(9)、大麻药甙A(10)、豆甾醇(11),其中化合物1和2是新的齐墩果烷型降三萜化合物(见图1)。

  1、实验部分

  1.1仪器与材料

  Bruker AV-400核磁共振仪(瑞士,布鲁克公司,TMS为内标);VG Auto-Spc-3000型质谱仪(英国,VG公司); 安捷伦1260高效液相色谱仪(美国安捷伦科技公司);半制备色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (21.2 × 250 mm,7 μm);旋转蒸发仪(N-1100D-WD,上海爱郎博仪器有限公司);循环水式真空泵(SHZ-G 巩义市予华仪器有限公司);低温冷却液循环泵(DLSB-5L/25 巩义市予华仪器有限公司);电热鼓风干燥箱(DHG-9070 上海一恒科学仪器有限公司);暗箱式紫外分析仪(2F-20D, 巩义市予华仪器有限公司);数显自动恒温不锈钢电热板(SG-150A上海硕光电子科技有限公司);柱层析硅胶(100~200目,200~300目;中国,青岛海洋化工厂);Sephadex LH-20 (20~150μm;瑞典,Pharmacia精细化工有限公司); GF254硅胶板试剂(青岛海洋化工厂);常用试剂为工业级石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇重蒸后使用;色谱纯甲醇和乙腈(GR,赛默飞世尔科技有限公司);水为自制超纯水;显色剂为10%硫酸乙醇溶液。

  大麻药样品于2014年9月采自云南省昆明市,经杨青松副教授鉴定为Dolichos falcata Klein,样本(201409DK)现存于云南民族大学民族药资源化学国家民族事务委员会—教育部重点实验室的标本室。

  1.2提取与分离

  大麻药根10.0 kg,经粉碎,用95%乙醇常温超声提取4次,过滤,合并滤液并浓缩得浸膏3.25 kg,将浸膏混悬于适量水中,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,将萃取液减压浓缩分别得到各个部分萃取物。乙酸乙酯萃取物(468.0 g)用柱层析硅胶(100~200目)进行层析,依次用V石油醚:V丙酮为50:1→0:1梯度洗脱,经TLC检测后合并相同组分,最后得10个组分(Fr. 1~Fr. 10)。对组分Fr.3~Fr.7分别经硅胶柱层析得亚组分,再经过Sephadex LH-20凝胶色谱、高效液相色谱等方法,纯化得11个单体化合物,其中从Fr.3获得化合物 5 (13.1 mg), 4 (41.2 mg),和6 (23.3 mg);从Fr.4分离得到化合物2 (8.3 mg)和3 (23.5 mg)和1 (12.6 mg);从Fr.5分离得到化合物7 (31.0 mg)和10 (63.9 mg);从Fr.6分离得到化合物11 (16.8 mg)、8 (13.1 mg)和9 (13.6 mg)。

  2、结构鉴定

  化合物1:白色无定形粉末,它的ESI-MS给出的准分子离子峰m/z 481[M+Na]+,由高分辨质谱(HR-ESI-MS)正离子模式得出来的分子量为m/z 459.3101[M+H]+(计算值458.3032)和NMR数据,推测其分子式为C28H42O5,不饱和度为8。红外IR(KBr)光谱在3424, 1652, 1416, 1083, 1020 和 668 cm-1处有吸收,表明化合物1含有羧基和双键结构。1H NMR谱(见表1)显示了六个甲基质子信号(δH 0.89, 0.96, 1.03, 1.17, 1.29, 2.37)和一个烯烃氢信号(δH 5.50, t, J=3.3 Hz)。13C和DEPT NMR谱中 (见表1) 显示了该化合物有28个碳信号,其中包含6个甲基信号(δC 17.2, 18.3, 23.6, 25.9, 31.6, 33.1)、1个孤立的羰基(δC 212.0)、2个羧基(δC 174.1, 182.4)和2个双键碳信号(δC 122.3, 144.4)。通过与化合物ivorengenin B[9]对比,表明化合物1是一个12-烯-裂环的降三萜骨架,主要区别在于化合物1缺少了一个含氧取代次甲基信号,多出一个亚甲基信号(δC 46.0)。以上推测进一步通过2D NMR数据得到确认,H2-19 (δH 1.70)和C-13 (δC 144.4)、C-18 (δC 41.9);H3-29 (δH 33.1)和C-19 (δC 46.1);H3-30 (δH 23.6和C-19的HMBC相关;以及H-18 (δH 3.24) 和H2-19的COSY相关,表明化合物1的19位比已知化合物ivorengenin B缺少了一个羟基取代。所以,通过进一步的HMBC及1H-1H COSY谱图分析(图2),以及类似化合物NMR数据比对,最终确定了化合物1的平面结构,见图1。

  通过ROESY谱图确定化合物1的相对构型。在ROESY谱图(图2)中,H-18与H-12、H-16β、H-19β、H3-29的相关,说明H-18为β构型。H-5和H-6α、H-9的相关,说明H-5为α构型。通过全面的ROESY谱图分析,可确定化合物1的相对构型与ivorengenin B完全一致。综上所述,确定该化合物为4-氧-3,24-双降-2,4-裂环-12-烯-2,28-齐墩果烷酸。

  化合物2:白色无定形粉末,由高分辨质谱 (HR-EI-MS) 正离子模式得出来的分子量为466.2720[M+]。分子式为C29H38O5,分子中有11个不饱和度。红外IR (KBr) 光谱在3414, 1776, 1629, 760 cm-1处有吸收,表明分子中有羟基和羰基的存在。1H NMR谱图数据(见表1)显示了六个甲基质子信号(δH 0.92 ,0.94 , 0.98, 1.31, 1.38, 2.01)、一个烯烃氢信号(δH 6.48)和一个羟基信号(δH 6.45)。13C和DEPT NMR谱中 (见表1) 显示该化合物有29个碳信号(11个-C-,5个-CH-,7个-CH2-,6个-CH3),其中包含2个羰基信号(δC 179.1, 181.6)、4个双键碳信号(δC 163.8, 145.0, 127.5, 123.3)、1个含氧取代的季碳信号(δC 87.3)和1个环氧结构的碳信号(δC 52.8, 57.5)。

  通过与已知化合物asprellol C[10]对比,表明化合物2是一个24位-降型的三萜骨架。在HMBC谱中,H3-29 (δH 0.98) 和 C-30 (δC 23.7)的相关,且H3-29和H3-30同时与δC 31.6 (C-20)、37.8 (C-19)和34.4 (C-21)相关,说明在C-20位有双甲基的取代。然而,H3-23 (δH 2.01) 和 C-4 (δC 127.5)的HMBC相关,说明在C-4位只有一个甲基的信号,C-24号甲基极有可能脱去。此外,H2-6 (δH 2.50, 2.80)和C-4 (δC 127.5),C-5 (δC 163.8),C-10 (δC 42.4)的HMBC相关,进一步证实了C-6位确实是一个亚甲基基团,比化合物asprellol C缺少了一个羟基取代。所以,化合物2的平面结构得以确认。在REOSY谱中,H-11与H3-25、H-12与H3-25的相关,说明11α,12α-环氧结构的存在。通过全面的ROESY谱图(图2)分析,可确定化合物2的相对构型与asprellol C完全一致。综上所述,确定该化合物为2-羟基-3-氧-11α,12α-环氧-24-降型-1,4-二烯-28,13β-齐墩果烷内酯(图1)。

  化合物3:白色无定形粉末。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 6.26 (1H, brs, H-1), 5.34 (1H, t, H-12), 2.90 (1H, dd, H-18), 2.79 (1H, m, H-6a), 2.40 (1H, m, H-6b), 2.28 (2H, m, Ha-11), 2.15 (1H, m, Hb-11), 1.99 (1H, m, Ha-16), 1.96 (3H, s,H-24), 1.83 (1H, m, Ha-15), 1.81 (1H, m, H-9), 1.72 (1H, m, Ha-19), 1.64 (2H, m, Ha-7), 1.61 (1H, m, Hb-16), 1.53 (2H, m, H-22), 1.52 (1H, m, Hb-7), 1.37 (2H, m, Ha-21), 1.30 (3H, s, H-25), 1.13 (1H, m, Hb-15), 1.12 (1H, m, Hb-19), 1.21 (1H, m, Hb-21), 1.12 (3H, s, H-26), 1.04 (3H, s, H-27), 0.95 (3H, s, H-30), 0.89 (3H, s, H-29), 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 183.2 (C-3), 182.3 (C-28), 167.8 (C-5), 146.4 (C-2), 145.8 (C-13), 127.6 (C-1), 127.6 (C-4), 123.2 (C-12), 47.9 (C-17), 47.0 (C-19), 46.7 (C-9), 44.8 (C-10), 43.8 (C-14), 43.0 (C-18), 35.7 (C-7), 34.9 (C-21), 33.8 (C-22), 31.6 (C-20), 29.2 (C-15), 26.6 (C-21), 25.9 (C-6), 25.8 (C-27), 24.1 (C-16), 23.9 (C-30), 21.8 (C-25), 17.6 (C-26), 10.7 (C-24)。通过与文献数据[8]仔细对比,最终确定该化合物为2-羟基-3-氧-24-降型-1,4,12-三烯-28-齐墩果烷酸.

  化合物4:白色粉末。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 3.14 (1H, dd, J=4.5 and 10 Hz, H-3), 5.20 (1H, t, J=3.5 Hz, H-12), 2.74 (1H, dd, J=1.5 and 10 Hz, H-18), 0.70 (3H, s, CH3-23), 0.71 (3H, s, CH3-24), 0.86(3H, s, CH3-25), 0.88 (3H, s, CH3-26), 0.93 (3H, s, CH3-27), 0.92 (3H, s, CH3-29), 1.07(3H, s, CH3-30).13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 38.8 (C-1), 27.6 (C-2), 79.6 (C-3), 39.1 (C-4), 55.6 (C-5), 18.7 (C-6), 33.8 (C-7), 39.6 (C-8), 48.0 (C-9), 37.4 (C-10), 23.4 (C-11), 122.8 (C-12), 143.7 (C-13), 41.5 (C-14), 28.1 (C-15), 23.8 (C-16), 46.8 (C-17), 42.0 (C-18), 45.6 (C-19), 30.1(C-20), 33.4 (C-21), 33.1 (C-22), 28.5 (C-23), 16.0 (C-24), 15.7 (C-25), 17.5 (C-26), 26.3(C-27) 181.4 (C-28), 34.2 (C-29), 23.9 (C-30)。通过与文献数据[11]仔细对比,最终确定该化合物为齐墩果酸。

  化合物5:1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 5.35 (1H, s, H-12), 3.46 (1H, t, J=8.4 Hz, H-3), 0.77 (3H, s, CH3-23), 0.89(3H, s, CH3-25), 0.94 (3H, s, CH3-26), 0.96 (3H, s, CH3-27), 1.12 (3H, s, CH3-29), 1.25(3H, s, CH3-30).13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 38.8 (C-1), 28.6 (C-2), 79.9 (C-3), 43.1 (C-4), 56.6 (C-5), 18.9 (C-6), 33.7 (C-7), 39.9 (C-8), 48.3 (C-9), 37.1 (C-10), 24.4 (C-11), 122.6 (C-12), 144.7 (C-13), 42.0 (C-14), 28.4 (C-15), 23.8 (C-16), 46.4 (C-17), 42.3 (C-18), 46.6 (C-19), 31.1(C-20), 34.5 (C-21), 33.8 (C-22), 23.5 (C-23), 64.5 (C-24), 15.8 (C-25), 17.4 (C-26), 26.2(C-27) 180.4 (C-28), 33.2 (C-29), 23.7 (C-30)。通过与文献数据[12]仔细对比,最终确定该化合物为异常春藤皂甙元。

  化合物6:1H NMR (400 MHz, CDCl3) δC: 5.26 (1H, m, H-12), 4.05 (1H, d, J=11.0 Hz, H-24b), 3.77 (1H, m, H-2), 3.38 (1H, d, J=11.0 Hz, H-24a), 3.03 (1H, d, H-3), 2.81 (1H, dd, H-18), 1.01 (3H, s, H-30), 0.98 (3H, s, H-29), 0.91 (3H, s, H-27), 0.83 (3H, s, H-23). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 47.8 (C-1), 69.8 (C-2), 85.9 (C-3), 43.6 (C-4), 57.2 (C-5), 20.1 (C-6), 34.3 (C-7), 40.6 (C-8), 49.5 (C-9), 39.4 (C-10), 24.9 (C-11), 123.4 (C-12), 145.4 (C-13), 42.9 (C-14), 28.7 (C-15), 24.3 (C-16), 47.8 (C-17), 42.7 (C-18), 47.5 (C-19), 32.0 (C-20), 35.2 (C-21), 33.8 (C-22), 23.9 (C-23), 66.4 (C-24), 17.8 (C-25), 17.5 (C-26), 26.6 (C-27), 181.8 (C-28), 24.2 (C-29), 33.7 (C-30)。通过与文献数据[13]仔细对比,最终确定该化合物为2α,3β,24-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸。

  化合物7:白色无定形粉末。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 5.56 (1H, m, H-12), 4.73 (1H, d, H-3),4.49 (1H, m, H-2), 3.31 (1H, dd, H-18), 2.02 (3H, s, H-24), 1.61 (3H, s, H-25), 1.28 (3H, s, H-26), 1.01 (3H, s, H-27), 0.93 (3H, s, H-30), 0.80 (3H, s,H-30),13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 44.9 (C-1), 71.3 (C-2), 75.7 (C-3), 53.7 (C-4), 52.0 (C-5), 21.3 (C-6), 33.2 (C-7), 40.1 (C-8), 48.7 (C-9), 36.8 (C-10), 23.7 (C-11), 122.4 (C-12), 144.7 (C-13), 41.9 (C-14), 28.1 (C-15), 23.7 (C-16), 46.5 (C-17), 42.2 (C-18), 46.5 (C-19), 30.7 (C-20), 34.2 (C-21), 33.2 (C-22), 180.0 (C-23), 13.5 (C-24), 16.8 (C-25), 17.2 (C-26), 26.1 (C-27), 180.8 (C-28), 33.2 (C-29), 23.7 (C-30). 通过与文献数据[14]仔细对比,最终确定该化合物为2α,3β-二羟基-12-烯-24,28齐墩果烷酸。

  化合物8:白色晶体。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 5.26 (1H, s, H-12), 3.44 (1H, t, H-3), 3.22 (1H, dd, H-22), 1.44 (2H, d, H-21), 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 15.6 (C-24), 15.6 (C-25), 16.9 (C-26), 18.3 (C-6), 20.0 (C-28), 23.5 (C-11), 25.4 (C-27), 27.2 (C-2), 28.1 (C-23), 28.2 (C-30), 28.2 (C-15), 28.9 (C-16), 30.5 (C-20), 32.7 (C-29), 32.9 (C-7), 37.0 (C-10), 37.4 (C-17), 38.8 (C-4), 38.7 (C-1), 39.7 (C-8), 41.5 (C-21), 42.1 (C-14), 44.8 (C-18), 46.20 (C-19), 47.7 (C-9), 55.2 (C-5), 76.6 (C-22), 79.0 (C-3), 122.5(C-12), 144.0 (C-13)。通过与文献数据[15]仔细对比,最终确定该化合物为槐二醇。

  化合物9:1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 5.25 (1H, s, H-12), 4.20 (1H, m, H-22), 3.44 (2H, m, H-24), 3.34 (1H, m, H-3), 1.24 (3H, s, H-23), 1.15 (3H, s, H-25), 1.03 (3H, s, H-26), 1.02 (3H, s, H-27), 0.95 (3H, s, H-28), 0.91 (3H, s, H-29), 0.86 (3H, s, H-30),13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δC: 38.9 (C-1), 28.3 (C-2), 80.2 (C-3), 43.3 (C-4), 56.2 (C-5), 19.1 (C-6), 33.4 (C-7), 40.1 (C-8), 48.1 (C-9), 37.2 (C-10), 23.5 (C-11), 122.4 (C-12), 144.7 (C-13), 42.4 (C-14), 25.5 (C-15), 28.6 (C-16), 38.1 (C-17), 42.4 (C-18), 46.6 (C-19), 32.7 (C-20), 45.2 (C-21), 74.3 (C-22), 24.0 (C-23), 64.5 (C-24), 16.3 (C-25), 17.1 (C-26), 26.3 (C-27), 28.7 (C-28), 30.7 (C-29), 28.7 (C-30)。通过与文献数据[16]仔细对比,最终确定该化合物为大豆皂醇B。

  化合物10:白色粉末。1H NMR (400 MHz, C5D5N) δH: 5.49 (1H, m, H-12), 5.10 (1H, d, H-1), 4.75 (2H, m, H-2 and H-3), 3.60 (3H, s, -COOCH3), 3.25 (1H, m, H-18), 2.01 (3H, s, H-24), 1.55 (3H, s, H-25), 1.28 (3H, s, H-26), 1.00 (3H, s, H-27), 0.93 (3H, s, H-30), 0.85 (3H, s, H-30),13C NMR (100 MHz, C5D5N) δC: 44.2 (C-1), 69.9 (C-2), 85.4 (C-3), 50.2 (C-4), 52.1 (C-5), 21.0 (C-6), 33.2 (C-7), 40.1 (C-8), 48.6 (C-9), 36.6 (C-10), 23.7 (C-11), 122.5 (C-12), 144.7 (C-13), 42.0 (C-14), 28.0 (C-15), 23.4 (C-16), 46.5 (C-17), 42.3 (C-18), 46.5 (C-19), 30.0 (C-20), 34.4 (C-21), 33.4 (C-22), 179.1 (C-23), 14.0 (C-24), 16.6 (C-25), 17.3 (C-26), 26.0 (C-27), 180.9 (C-28), 33.2 (C-29), 23.7 (C-30), 52.1 (-COOCH3), 103.8 (glc-C-1), 74.6 (glc-C-2), 77.1 (glc-C-3), 70.6 (glc-C-4), 77.1 (glc-c-5), 61.7 (glc-c-6)。通过与文献数据[17]仔细对比,最终确定该化合物为大麻药甙A。

  化合物11:白色晶体。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δH: 5.36 (1H, d, J=5.2 Hz, H-6), 5.20 (1H, m, H-22), 5.04 (1H, m, H-23), 3.50 (1H, m, H-3), 1.00 (3H, s, H-19), 0.89 (3H, s, H-21), 0.78 (3H, s, H-26), 0.75 (3H, s, H-27), 0.72 (3H, s, H-29), 0.61 (3H, s, H-18),13C NMR(400 MHz, CDCl3) δC: 37.3 (C-1), 31.9 (C-2), 71.8 (C-3), 42.4 (C-4), 140.8 (C-5), 121.7 (C-6), 31.9 (C-7), 31.9 (C-8), 50.2 (C-9), 36.5 (C-10), 21.0 (C-11), 39.8 (C-12), 42.4 (C-13), 56.9 (C-14), 24.4 (C-15), 28.7 (C-16), 56.2 (C-17), 11.8 (C-18), 19.9 (C-19), 40.3 (C-20), 21.1 (C-21), 138.2 (C-22), 129.4 (C-23), 51.3 (C-24), 31.5 (C-25), 21.3 (C-26), 18.9 (C-27), 25.4 (C-28), 11.9 (C-29)。通过与文献数据[18]仔细对比,最终确定该化合物为豆甾醇。

  3、活性测定

  通过96孔板对各化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行测定。分别为酶活性组(PBS+酶+底物),酶空白组(酶+PBS),样品组(酶+样品+底物),样品对照组(PBS+样品),加缓冲液补足总体积。每组设置3个复孔,总体积为150μ L;各管加入50 μL PBS 、10 μL样品和20 μL葡萄糖苷酶溶液,37 ℃恒温反应5 min 后,各管加入底物20 μL,接着在37 ℃下继续恒温反应15 min,再加入0.2 mol/L 碳酸钠溶液50 μL 终止反应,于波长为400 nm 处测定吸光度(A)。样品对酶活性的抑制率(%)按该式计算:抑制率(%) =1- (A样品−A样品对照)/(A酶活性−A酶空白)×100%。

  结果显示,化合物1、3和4具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50值分别为84.0、43.3和71.9 μM。以阿卡波糖为阳性对照,其IC50值为310.3 μM,说明大麻药在降血糖方面有一定作用,为进一步研究大麻药的降血糖功效提供了科学依据。

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责任编辑:高燕仙
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